英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒（SN3104）：20分鐘解鎖96.8%高純度細胞分選

　　英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒（SN3104）：20分鐘解鎖96.8%高純度細胞分選

　　在免疫學研究和細胞治療領域，精準獲取高純度naïve CD4 T細胞是攻克自身免疫疾病、優化CAR-T療法的關鍵。英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒（貨號SN3104）憑借無柱磁極分選技術和陰性篩選策略，實現從PBMC中快速分離目標細胞，為科研與臨床提供高效解決方案。

　　一、技術原理：陰性分選保障細胞活性

　　本試劑盒采用生物素-鏈霉親和素磁珠偶聯系統，通過三步精準標記實現高效分離：

　　1.靶向標記非目標細胞：生物素偶聯抗體特異性結合CD8?T細胞、B細胞、單核細胞等非naïve CD4 T細胞表面標志物

　　2.磁珠高效捕獲：鏈霉親和素納米磁珠（40 nm粒徑）與標記細胞結合，形成磁性復合物

　　3.無柱磁極快速分離：通過磁力架吸附非目標細胞，未標記的CD45RA?CD45RO?naïve CD4 T細胞直接富集于上清液

　　技術優勢：

　　?避免抗體與目標細胞接觸，維持天然細胞狀態

　　?納米磁珠減少機械損傷，細胞活性**>95%**

　　?全程無需分選柱，降低樣本損失風險

　　二、標準化操作流程（18-20分鐘完成）

　　1.PBMC預處理

　　采用密度梯度離心法獲取PBMC，調整濃度至1×10?cells/mL，70μm濾網過濾去除團塊

　　2.抗體孵育（10分鐘）

　　按100μL/mL比例加入分離雞尾酒，常溫孵育10分鐘，標記非目標細胞

　　3.磁珠偶聯（5分鐘）

　　震蕩激活鏈霉親和素納米磁珠30秒，以100μL/mL加入樣本，輕柔混勻后靜置

　　4.體積擴展與磁分選

　　1.流式管體系：補加FACS Buffer至2.5 mL

　　2.離心管體系：補加至7.5 mL

　　垂直置于磁力架吸附（單孔3分鐘/聯排5分鐘），傾倒上清即獲目標細胞

　　三、性能驗證與核心數據

　　經流式細胞術驗證（圖B）：

　　?分選前：PBMC中CD4?T細胞占比31%，其中naïve亞群僅43%

　　?分選后：

　　?CD4?T細胞純度97.1%

　　?CD45RA?CD45RO?naïve亞群純度96.8%

　　?細胞得率≥85%（與樣本質量相關）

　　關鍵質控提示：

　　•使用含2%FBS的專用FACS Buffer，避免滲透壓波動

　　•嚴格無菌操作，確保細胞培養兼容性

　　•建議搭配聯排磁力架處理多樣本

　　四、三大應用場景推薦

　　1.免疫機制研究：分離后的naïve CD4 T細胞可直接用于：

　?。?）TCR信號通路分析

　?。?）Th細胞分化動態追蹤

　　（3）單細胞轉錄組測序建庫

　　2.細胞治療開發：

　?。?）CAR-T療法中naïve T細胞的優先選用

　?。?）腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）擴增前分選

　　3.疾病模型構建：

　?。?）自身免疫疾病過繼轉移模型

　　（2）HIV潛伏感染機制研究

　　為何選擇SN3104？

　　•時間成本銳減：比流式分選快6倍，較傳統磁珠分選省30%操作步驟

　　•成本效益突出：單次處理量達1×10?細胞（SN3104L規格），適合大規模實驗

　　•數據可重復性高：經多中心驗證，批間差<5%

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